优发国际(平台)随优而动一触即发

 SuperCultureTM  小鼠淋巴细胞培养基（Serum-Free Medium for Lymphocyte）适用于小鼠淋巴细胞、DC 细胞的体外培养。本产品是一款化学成分限定的培养基，该培养基中的所有成分均使用细胞培养级别的原料生产，不含血清，有效避免血清质量变动及血清组分、外源成分对实验研究的影响，可实现小鼠淋巴细胞、DC 细胞等免疫细胞的体外培养。

使用方法：

例1：小鼠T淋巴细胞培养

1、 培养器皿的预包被：取 5μg/ml 小鼠 CD3 单抗包被培养器皿，4℃过夜或 37℃孵育 2 小时。使用前移除剩余包被液。

2、 将 SuperCultureTM  小鼠淋巴细胞培养基放置室温平衡。

3、 无菌分离小鼠外周血淋巴细胞或脾脏淋巴细胞（建议使用达优小鼠淋巴细胞分离

液：DKW33-R0100）。

4、 根据计数结果，用SuperCultureTM  小鼠淋巴细胞培养基将分离获得的淋巴细胞按2-2.5×106 个/ml 的浓度接种于已包被小鼠 CD3 单抗的细胞培养器皿中，加入 5μg/ml 的小鼠 CD28 单抗、300U/ml 的 rmIL-2，刺激 T 淋巴细胞的生长和增殖，37℃，5% CO2、饱和湿度的培养箱中培养。

5、 观察细胞活化状态，每 2-3  天取样计数细胞浓度并根据计数结果补充新鲜

SuperCultureTM  小鼠淋巴细胞培养基（含 300U/ml 的 rmIL-2），调整细胞浓度为 1.5×106个/ml。

6、 收获细胞供后续检测或实验使用。

例2：小鼠骨髓DC细胞培养

1、 将 SuperCultureTM  小鼠淋巴细胞培养基放置室温平衡。

2、 无菌分离小鼠骨髓单核细胞。根据计数结果，用 SuperCultureTM  小鼠淋巴细胞

培养基将分离获得的单核细胞按 1-5×106 个/ml 的浓度接种于 6 孔板或 12 孔板中，每孔加入终浓度 200U/ml 的 rmGM-CSF 和 rmIL-4，37℃，5% CO2、饱和湿度的培养箱培养。

3、 48 小时后，轻轻晃动培养板，吸弃全部培养基及悬浮细胞，加含 200U/ml 的 rmGM-CSF 和 rmIL-4 的新鲜培养基继续培养。

4、 隔日半量换液，即收集旧培养液，离心后用含 200U/ml 的 rmGM-CSF 和 rmIL-4

的新鲜培养基重悬细胞沉淀，然后再将细胞悬液放回原皿。

5、 第 6 天半量换液后加细胞因子 TNF-α 1000U/ml 或其他促成熟的细胞因子，继

续培养两天，以促进树突状细胞成熟（可在 TNF-α 加入前 1 天加入抗原，以获得抗原负载的 DC）。

6、 收集悬浮和轻微贴壁的细胞，即为成熟的 DC。

保存方法：

2～8℃，避光保存，保持无菌，保质期 12 个月。

注意：

本品避免反复冻融，使用时注意无菌操作。

本品培养T淋巴细胞时，加入2-5%的细胞培养添加物可增强细胞扩增效率。

本品仅供研究使用。